(1)选材

进行组织培养材料一般选取茎尖和根尖接种，在适宜的培养基上容易进行细胞分裂，分化形成新的植株。茎尖的大小和成活率及脱毒效果有密切关系，茎尖越大，成活率越高；茎尖越小，脱毒效果越好，但成活率相应降低。

组织培养材料大多取自野外，带有大量的和霉菌等，一旦与培养基接触会迅速繁殖，使组织培养失败。必须对材料进行彻底，取得无菌材料。及的原则是既杀灭培养材料上的病菌，又不损坏或只轻微损坏培养材料。操作步骤为：取田间当年生新梢或一年生枝，去叶，用自来水将表面刷洗干净，剪成一芽一段，放人烧杯拿进超净工作台，先用r70%酒精浸泡2～4秒，再用0.1%的液5～10分钟，无菌水冲洗3遍。

(2)接种

培养基多采用IS基本培养基，附加6BA（6一苄氨基腺嘌呤）0.5～1.0毫克／升+IBA（吲跺丁酸）0.3～0.5毫克／升，蔗糖为30克／升。将后的芽剥去鳞片、叶柄，取出带数个叶原基的茎尖接入培养基，半包埋。培养条件光照10001x条件下8r_10小时，黑暗中14～16小时；温度25～28℃的培养室培养1～2周，及时检查，将未感染的茎尖转接到新培养瓶内，丢弃发生感染的材料。一般培养1～2月分化出的芽可长到2～3厘米长，其后，约每25天左右进行一次继代培养，每次芽的增殖量约为4～6倍。

(3)诱导生根

当分生苗长到2～3厘米高时应及时转入生根培养基诱导生根。生根培养基多采角1/2MS+IBAO.1r_o．5毫克／升，加生长素AA或NAA（萘乙酸）等，一般天左右即可生根。第二周根原基即开始分化，第三周能长出3-J8条根，。其生根率达o生根苗长到3～5厘米高时即可炼苗移栽。

(4)移栽

移栽前需要一个锻炼适应的过程，锻炼的方法为：将培养瓶移至自然光照下锻炼2～3天，打开瓶口再锻炼2---3天，然后进行移栽。

移栽时先洗净根上的培养基，避免培养基感染杂菌，导致苗死亡。移栽要小心操作。移栽方法及灌水、遮阴等措施同实生苗移栽。